ABSTRACT
Intoducción. Objetivo: evaluar las modificaciones en los niveles de IgA y la fracción 3 y 4 del complemento (C3 y C4) y las algutininas en la leche humana al ser sometida a calentamiento rápido empleando el horno de microondas. Material y métodos. Mediante un ensayo clínico (antes, después) en muestras de leche humana elegidas al azar, se estudiaron 46 muestas de leche, recolectadas en los primeros 5 días del puerperio, proveniente de madres con embarazo y parto sin complicaciones. Se fraccionaron las muestras para formar 2 grupos, la muestra de leche del primer grupo se mantuvo en temperatura ambiente (grupo 1) y la segunda se incluyó para ser calentada durante 30 segundos a temperatura máxima en un horno de microondas de marca comercial (grupo 2). En ambas muestras se determinaron las concentraciones de IgA total, y la aglutinación contra Candida albicans. Resultados. La temperatura a la que fueron sometidas las muestras del grupo 2 fue de 55.5 ºC (límite de 32 a 72 ºC). Al comparar los resultados entre ambos grupos se observaron que los valores de IgA fueron de 0.95 y 0.63 g/L (P< 0.001), C3 de 2.22 y 0.49 g/L (P< 0.01), C4 de 3.7 y 1.21 g/L (P< 0.0003) y las aglutininas con dilución de 1467 y 1156 (P< 0.04), para los grupos 1 y 2 respectivamente. La temperaturar crítica fue diferente para cada variable. Para la IgA y C3 fue de 50 ºC; para C4 y las aglutininas fue de 56 ºC. Conclusiones. Se documentó el efecto negativo en la concentración de IgA, C3 C4 y aglutininas por efecto del calentamiento en el horno de microondas. La temperatura generada por este medio es alta y difícilmente controlada. Por lo que no se recomienda el clentamiento de la leche humana en el horno de microondas
Subject(s)
Agglutinins/analysis , Agglutinins/isolation & purification , Attention , Complement C3/isolation & purification , Complement C4/isolation & purification , Immunoglobulin A/analysis , Microwaves/adverse effects , Milk, Human , Randomized Controlled Trials as TopicABSTRACT
Se describe un método de purificación del componente C4 del sistema complemento a partir de suero humano, mediante una combinación de cromatografía de intercambio iónico y de afinidad y la preparación de un antisuero específico. El suero humano calentado a 56 C durante 30 minutos se fraccionó por medio de una columna de DEAE-52 con solución tampón fosfato 0,01 M, pH 7,0 + NaCl 0,075 M. Se aplicó un gradiente lineal de concentración mediante el empleo de solución amortiguadora de fosfato 0,01 M, pH 7,0 + NaCl 0,075 M-1,5 M. Se detectó la presencia de C4 en las fracciones eluidas y las seleccionadas se aplicaron a una colunma de Spharose 4 B a la cual se acopló la fracción IgG de un suero anti C4. Mediante electroforesis en gel de poliacrilamida e inmunoelectroforesis contra un suero antiproteinas séricas humanas y un antisuero específico, se determinó la pureza del C4 obtenido. A partir del C4 purificado se produjo un antisuero potente y de buena calidad, en conejos, útil para la cuantificación del C4 sérico